使用Anyeep TQ9100测定人血浆中15种胆汁酸的含量

胆汁酸是胆汁的主要功能成分，参与肝肠循环，其含量是衡量肝胆功能正常与否的重要标志物。目前，胆汁酸检测的主要应用场景为妊娠期肝内胆汁酸淤积症（Intrahepatic Cholestasis of Pregnancy, ICP）的筛查。

目前临床上针对15种胆汁酸主要使用 LC-MS/MS 法进行分析测定，该方法简便、灵敏，特异性好。因此，本方法采用 Anyeep TQ9100液相色谱串联质谱系统，测定人血清中胆酸（CA）、甘氨胆酸（GCA）、牛磺胆酸（TCA）、脱氧胆酸（DCA）、甘氨脱氧胆酸（GDCA）、牛磺脱氧胆酸（TDCA）、鹅脱氧胆酸（CDCA）、甘氨鹅脱氧胆酸（GCDCA）、牛磺鹅脱氧胆酸（TCDCA）、熊脱氧胆酸（UDCA）、甘氨熊脱氧胆酸（GUDCA）、牛磺熊脱氧胆酸（TUDCA）、石胆酸（LCA）、甘氨石胆酸（GLCA）、牛石氧胆酸（TLCA）。

仪器与试剂

Anyeep TQ9100超高效液相色谱串联质谱系统

乙腈（质谱纯，美国 Thermo Fisher 公司）

水（超纯水）

甲酸（德国默克公司）

液相条件

流动相A：0.1%甲酸，水

流动相B：乙腈

色谱柱：Agilent Poroshell 120 EC C18 column 2.1mm×100mm 1.9 μm

柱温：40 ℃

流速：0.25 mL/min

进样量：5 μL

质谱条件

离子化源： 电喷雾离子化源（ESI﹣）

源温度： 550 ℃

喷雾电压： 2500 V

气帘气： 10 psi

雾化气： 50 psi

辅助气： 55 psi

碰撞气： 8

扫描模式：MRM

样本处理

取待测样本100 μL，加入20 μL内标，380 μL乙腈，涡旋混匀并离心（4 ℃，15000 rpm，5 min）；取上清液400 μL于96孔板中，40 ℃氮吹至干；加入100 μL复溶液（50%乙腈），置于微孔板震荡仪上1200 rpm/min 震摇5 min，4000 rpm 离心5 min，5 μL进样。

总结

本方法使用安益谱全自主研发生产的 TQ 9100三重四极杆串联质谱系统，实现了血浆中15种胆汁酸的同时检测，该方法线性好、准确度高、特异性强，每个样本分析仅需6分钟，具有较高的通量，适合临床检测分析。