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为什么在体外培养内皮细胞时施加剪切力很重要!

科适特

2022/03/29 17:55

阅读:47

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流体环境下的细胞


影响关键因素是什么

1.jpg



剪切力(dyn/cm2

体内的内皮细胞通常存在于它们不断暴露于血流摩擦力(称为剪切应力)的环境中。

剪切应力是生理条件下内皮细胞功能的关键调节因子,流动障碍和剪切应力改变与

动脉粥样硬化或血栓形成等病理有关。内皮细胞通过各种受体感知剪切应力,并将

机械剪切应力刺激传递到细胞内信号传导中,导致细胞功能和表型发生变化



血液流动

图片2.jpg




细胞如何感知剪切力

图片3.jpg

剪切力由细胞表面的流量传感器感应,内皮细胞表达各种机械传感信号


5.jpg

细胞骨架在整个细胞的剪切力传递中起着关键作用,信号通过细胞骨架元件传递到各种细胞内位点。




流体环境下细胞—模拟血管

0.jpg

在模拟流体生理条件下体外培养内皮细胞:

•细胞形态的变化

•肌动蛋白应力纤维的形成

•稳定性粘附连接和紧密连接(屏障形成)

vQQ截图20220329165742.png

HUVEC的免疫荧光染色,分别在静态条件下和流动下培养5天



流体活细胞-活细胞成像

流体下的活细胞成像可以实时可视化剪切应力效应(例如,肌动蛋白应激纤维的形成)

QQ截图20220329163104.png

QQ截图20220329163124.png

QQ截图20220329163156.png

QQ截图20220329163218.png

HUVEC在20 dyn/cm2下培养的LifeAct-TagGFP2。图像分别以相差和荧光拍摄



模拟淋巴血管中的流动

系统设置: 

1) ibidi Pump System 

2) µ-Slide I 0.8 Luer 

3) Oscillating flow  (4 dyn/cm2; 0.25 Hz; 48h)


QQ截图20220314150451.jpg

Courtesy of A. Sabine, Universityof Lausanne, Switzerland

(refer to A. Sabine et al., TheJournal of Clinical Investigation, 2015)



QQ截图20220329155710.png

FOXC2 和振荡剪切应力维持淋巴管内皮细胞-细胞连接和血管完整性。



流体环境下—滚动和粘附试验

研究流动下的细胞-细胞附着可以深入了解免疫细胞-内皮细胞的相互作用(e.g., during inflammation)

图片10.jpg

QQ截图20220329163316.png

QQ截图20220329163245.png

单层的 LPS 刺激脑血管内皮细胞( CVEC )以1 dyn / cm灌注 的颗粒细胞。


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