HighFive昆虫细胞（保成活）

最好用塑料瓶培养，如果是玻璃瓶,那么可以用鼠尾胶原包被一下培养瓶，或者用盐酸对培养瓶进行蚀刻，或者涂Laminin/fibronectin/collagen/BSA，也可以帮助细胞贴附新的培养瓶，细胞不易贴壁，建议加多聚赖氨酸处理。

细胞培养中常见的“颗粒”可分为胞内和胞外两种，很多小伙伴因为不清除这些“颗粒”的来源，害怕污染而将细胞丢弃，不仅浪费心力，还耽误实验进度，接下来我们逐步分析这些“颗粒”产生的原因。

色谱分析实验中，标准品使用方式灵活多样：（少量纯品配制成）低浓度标液直接使用、（纯品配制成）高浓度标准溶液稀释使用。我们在实验室天天接触，熟悉却不一定了解它们。一支标准品从原液或纯品形态“变身”为直接使用的形态，通常会经历标准品→储备液→工作液阶段，不同阶段的有效期也不同。

原代细胞：从体内直接分离的细胞。功能、代谢、形态类似体内细胞的特点，因此原代细胞适用于分析单个细胞形态、代谢、功能。原代细胞的缺点是：细胞均一性差，因为从特定组织取下来的原代细胞可能处于不同的发育时期。增殖能力差、培养时间受限、转染效率低。

准备工作，培养基的配制及灭菌（121-126度灭30分钟高压蒸汽式灭菌），玻璃器皿的灭菌（170度灭2小时干热灭菌，也可用湿热灭菌）若量大可加长灭菌时间。

流式细胞术（flowcytometry，FCM）是一种综合应用光学、机械学、流体力学、电子计算机、细胞生物学、分子免疫学等学科技术，使被测溶液流经测量区域，并逐一检测其中每一个细胞的物理和化学特性，从而对高速流动的细胞或亚细胞进行快速定量测定和分析的方法。

细胞凋亡通常称为细胞程序性死亡，是由基因控制的主动性细胞死亡过程。越来越多数据发现，细胞凋亡与多种疾病密切相关，如癌细胞具有连续增殖、抵抗细胞凋亡能力，利用流式细胞仪分析细胞凋亡可为肿瘤诊断，疗效评价和预后预测提供了重要的参考指标。

向容器内加入所需水量的一部分，按照培养基的配方，称取各种原料，依次加入使其溶bai解，最后补足所需水分。对蛋白胨、肉膏等物质，需加热溶解，加热过程所蒸发的水分，应在全部原料溶解后加水补足。

动物细胞培养是指细胞在体外条件下的生长，动物细胞在培养的过程中不再形成组织。 从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。

制备动物细胞培养液体培养基（需加入血清，保证无菌无毒），将细胞接种至培养基，放入二氧化碳培养箱中进行初代培养。 　　 　　当细胞增殖达到一定程度，出现接触抑制现象时，用胰蛋白酶再次处理，并用细胞悬液吹打贴壁生长的细胞。进行细胞计数。 　　 　　依照计数结果，分瓶培养，进行传代培养。获得细胞系或细胞株。

用过的试管要立即用清水冲洗干净；但滴瓶上的滴管不能用水冲洗，也不能交叉使用。

在原核细胞内，参与翻译的mRNA具有以下特点：具有较为保守的核糖体结合位点（RBS）GGAGG，位置大概在起始密码子上游的3~9个碱基。

培养基与菌种分离是从含有多种微生物的样品中获得纯种微生物的操作技术。菌种分离主要在培养皿上进行，常用的方法是稀释法和划线法。使用这两种方法的目的是是微生物的一个个体通过繁殖，在固体培养基上长出肉眼能见的群体，根据培养特征，用接种针调取所需菌种并在显微镜下检查，证明为单一形状的菌体。常用的培养基是选择培养基。

细胞培养作为很多实验的基础，在生物工程领域的重要性不言而喻。现在，随着昆虫杆状病毒表达载体系统（BEVS）的广泛应用，昆虫细胞的体外培养也越来越受到重视。从1915年，昆虫细胞培养起始，经过一百多年的发展，已在细胞、分子、医学等方向广泛应用。目前，常用于培养的昆虫细胞以草地贪夜蛾细胞株Sf9和Sf21，以及粉纹夜蛾细胞株Tn5B1-4（商品名High Five）为主。

标准品一词常作为泛称。在色谱分析工作中，我们进行样品理化分析时常用的标准品大多属于“化合物纯度/浓度标准品”。此时，“标准品”这一称呼涵盖了非医药行业常说的“标准物质”、“标准样品”以及医药行业常说的“中药对照品”、“化学对照品”等。

血清并不是生来就为养细胞而来的。血清是全血的一部分，组分很复杂，有 150 多种已知组分组分，多种未知组分。这些组分中，有些对细胞生长是有利的，有些对细胞生长是无作用的，有些对细胞生长反而是有害的。

细胞爬片是一种将细胞培养在玻璃或塑料表面上，使其附着并扩展的技术。这种技术可以用于观察细胞形态、细胞运动、细胞-细胞相互作用等。我们在做免疫荧光（IF），激光共聚焦(Confocal)，凋亡检测（TUNEL）时，免不了要制备细胞爬片，爬片质量完全决定了最后拍照的质量以及实验数据的精准性。今天，远慕生物就教大家如何制备好的细胞爬片。

在被检标本中，常混杂有多种细菌，平板划线分离法可使这多种细菌在培养基表面分散生长，各自形成菌落，以便根据菌落的形态及特征，挑选单个菌落进行纯培养。

细胞周期分析是分子生物学常用的实验方法，尤其在抗肿瘤药物研究上使用普遍。但细节若是处理不好，做得再多也做不出正确的、好看的分布图。今天远慕生物来测下如何准确制备细胞周期测试的样品，科研实验的小伙伴们一起来了解下！

核酸染料是一种灵敏、稳定和相对安全的荧光核酸染色试剂，是生物实验中不可或缺的一分子，尤其是在核酸检测相关试验中，所以核酸染料对于分子生物学相关专业的学生来说并不陌生，该如何选择适合自己使用的核酸染料呢？