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HPLC法YMC-Triart C18色谱柱分离工业大麻中大麻二酚和褪黑素的应用

上海汉尧发布时间:2020/04/09 09:28 点击: 加载中..

作者 Jeffrey A. Kakaley, YMC美国公司

前言:

本文说明YMC-Triart C18色谱柱可作为用HPLC方法分离检测大麻二酚(CBD)和褪黑激素的很好应用。

背景:

YMC美国公司应客户要求开发一种快速、易于运行的5:1混合物同时检测CBD和褪黑激素HPLC方法。这位顾客开发一种非处方(OTC) 助眠剂,这种助眠剂活性成分就含有CBD和褪黑激素,所以需要一种简易的定量分析方法。

样品处理:

将10mg的褪黑素加入10mL的容量瓶中,制成1.0mg/mL的褪黑素原液。加入5mL稀释液(45:55乙腈:水),烧瓶超声1分钟。褪黑素完全溶解后,将烧瓶稀释至标记。CBD的原液本身作为标准不需要做,厂家提供的是乙腈溶液1.0mg/mL。

样品中CBD:褪黑激素的比例为5:1,浓度分别为0.05mg/mL和0.01mg/mL。将50uL的CBD原液移入2mL的HPLC瓶中,10uL的褪黑激素原液和940uL的稀液混合均匀。

实验参数:

流动相A:  HPLC级水

动相B: 乙腈                                         

柱温度:40 °C

流速:1.0mL/min

进样量:15 uL

检测波长:225nm

色谱:YMC-Triart C18, 150x4.6mm, 3 m, P/N: TA12S03-1546WT

高效液相色谱系统:Agilent 1260

梯度:

 

结果与讨论:

之所以选择YMC-Triart C18作为此应用色谱柱,是因为它作为方法开发色谱柱优异性能。早期对一些等条件进行了评估发现褪黑激素峰形差,CBD洗脱时间长,等条件不理想。后面尝试了几种不同的梯度条件确定2分钟的线性梯度(55-95%B)然后在95%B处停留4分钟以洗脱CBD。分离效果见1。

 

结论:

结果表明,YMC Triart C18是分离CBD和褪黑激素优质候选色谱柱。按照客户的要求完成了一个少于10分钟快速而简单的分析方法。根据样品类型和配方,很可能需要额外的开发工作。


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