液相色谱柱的封端与不封端

青岛天泽生物

2023/02/10 10:46

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液相色谱柱由柱管、压帽、筛板（滤片）、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成，管内壁要求有很高的光洁度。为提高柱效，减小管壁效应，不锈钢柱内壁多经过抛光。有时也在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度，其效果与抛光相同。还有使用熔融硅或玻璃衬里的，用于细管柱。色谱柱两端的柱接头内装有筛板，是烧结不锈钢或钛合金，目的是防止填料漏出，柱内径一般是根据柱长、填料粒径和折合流速来确定，目的是为了避免管壁效应。

目前液相色谱柱主要有两种填料的基质，一种是硅胶基质，一种是聚合物基质。其中硅胶基质占绝大多数，因为硅胶基质机械强度高，表面易于修饰和控制，我们可以通过不同的手段，键合不同的基团。聚合物的填料具有很强的疏水性，稳定性比硅胶要强，一般应用于凝胶色谱或者是大分子体积排阻色谱的分离。

封端主要应用于硅胶基质的色谱柱中，我们也叫作封尾，是指在硅球表面进行键合之后，有一些自由的硅羟基裸露出来，为了减少自由的硅羟基与一些化合物进行二次作用，通常用一个短链的烃与其进行反应，覆盖这些自由的硅羟基。对于一些极性样品来说，没有封端和经过封端处理的色谱柱选择性上会有明显的差异。那么，液相色谱柱封端与不封端对检测结果有哪些影响？

1）由于空间位阻效应，较大的硅烷分子不可能与载体表面上较小的硅羟基全部发生反应，因此残余羟基是不可避免的，当使用双或三官能团硅烷化试剂时，还会产生新的硅羟基。

这些残余羟基，特别是在反相填料的情况下，对产品的性能影响很大，它可以减小表面的疏水性，对极性化合物，特别是碱性溶质产生二次化学吸附，而残余羟基浓度的变化又是产品性能不重复的重要原因。

所以除对键合反应本身进行改进之外，键合反应结束后，一般都要用三甲基氯硅烷或六甲基二硅胺等小分子硅烷进行处理，即封尾（封端），以尽量减少残余硅羟基，这对提高键合相填料的稳定性是很重要的。

2）另一方面，也有一些色谱柱是不封尾的，以使其与水系统流动相有更好的“湿润”性能，在一定的条件下可以对某些极性化合物的分析提供更好的分离效果。

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