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涡旋振荡器在藻类脂肪酸的测定 气相色谱法试验中的作用
2023/05/11 10:36
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方案摘要：
产品配置单：
WIGGENS WB-504C 冷冻真空离心浓缩仪
型号： WB-504C
产地： 德国
品牌： WIGGENS
¥30.84万
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WHEATON Dounce型 组织研磨器
型号： WHEATON Dounce
产地： 美国
品牌： WHEATON
¥2000 - 1万
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WIGGENS Vortex 3000 Elite涡旋振荡器
型号： Vortex 3000 Elite
产地： 德国
品牌： WIGGENS
¥3360
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WIGGENS WSI-50 常温型可叠加振荡培养箱
型号： WSI-50
产地： 德国
品牌： WIGGENS
¥4.6万
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WIGGENS WCI-850C细胞工厂 / CO2 培养箱
型号： WCI-850C
产地： 德国
品牌： WIGGENS
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型号： Digital 525
产地： 德国
品牌： SOCOREX
¥5500
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WIGGENS DPM24 数字式脉冲高速振荡器
型号： DPM24
产地： 德国
品牌： WIGGENS
¥1.68万
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方案详情：
涡旋振荡器在藻类脂肪酸的测定 气相色谱法试验中的作用
（根据中华人民共和国海洋行业标准HY/T 228-2018）
一、原理
脂肪酸是指一端含有一个羧基 的长的脂肪族碳氢链，是有机物，直链饱和脂肪酸的通式是C(n)H(2n+ 1)COOH，低级的脂肪酸是无色液体，有刺激性气味，高级的脂肪酸是蜡状固体，无可明显嗅到的气味。脂肪酸是最简单的一种脂，它是许多更复杂的脂的组成成分。脂肪酸在有充足氧 供给的情况下，可氧化分解为CO2和H2O，释放大量能量，因此脂肪酸是机体 主要能量来源之一。
藻类样品中的脂肪酸，经氢氧化钠甲醇溶液皂化和盐酸甲醇溶液甲酯化，经正己烷提取后，用气相色谱法测定。
二、使用试剂
1. 氢氧化钾
2. 盐酸
3. 氯化钠
4. 正己烷
5. 甲醇
6. 无水硫酸钠：400℃灼烧4h，冷却后密闭保存，有效期1个月
三、试剂配制
1. 饱和氢氧化钾甲醇溶液：称取40g氢氧化钾溶解在100ml甲醇中，搅拌溶解，澄清备用，室温下可放置2个月。
2. 盐酸甲醇溶液：量取10ml盐酸溶解在110ml甲醇中，混匀，室温下可放置2个月。
3. 饱和氯化钠溶液：称取360g氯化钠溶液在1L蒸馏水中，搅拌溶解，澄清备用，室温下可放置2个月。
四、使用仪器
1. 气相色谱仪：具有氢火焰离子化检测器
2. 电热恒温水浴锅
3. 电子天平
4. 粉碎机
5. 具塞离心管
6. 容量瓶
7. 研钵
五、分析步骤
1.藻粉的制备 藻类经冷冻干燥24h，干燥后大型藻经过粉碎机粉碎过80目筛
2.皂化 用天平称取藻粉约20mg，放入研钵中，准确加入0.2ml十一碳酸甘油三酯内标溶液，加入液氮反复研磨2~3次，每次5min，用6ml饱和氢氧化钾甲醇溶液分2~3次将研磨后的藻粉转移至具塞离心管中，混匀。将离心管放入60℃JULABO PURA22通用水浴槽内加热处理60min，每隔10min取出振荡5~10s，处理结束后取出离心管冷却至室温。
3.甲基化 皂化后的试样加入4ml 1mol/L盐酸甲醇溶液混匀，将离心管放入60℃水浴锅内加热处理20min，每隔10min取出振荡5~10s，处理结束后取出离心管冷却至室温。
4.萃取 甲基化后的试样准确加入1ml正己烷，加入3ml饱和氯化钠溶液，将管盖拧紧，用WIGGENS Vortex 3000 Elite涡旋振荡器2min，静置3~5min待溶液分层后，取大约0.5ml上层正己烷，用无水硫酸钠脱水后进行气相色谱分析。
六、仪器测试条件
取单个脂肪酸甲酯标准溶液和脂肪酸甲酯混合标准溶液分别注入气相色谱仪，对色谱峰进行定性。色谱分析条件如下：
1. 色谱柱：毛细管色谱柱涂层为键合/交联聚乙醇，涂层厚度0.25um，内径0.25mm，长度为30m。
2. 载气：高纯度氢气 1.5mL/min
3. 氢气：高纯 30mL/min
4. 空气：高纯 300mL/min
5. 尾吹：高纯氮气 35mL/min
6. 检测器温度：300℃
7. 进样口温度：250℃
8. 进样量：1um
9. 进样方式：无分流进样
10. 升温程序：初温50℃，保持5min，25℃/min升到180℃，1℃/min升到190℃，保持10min，1℃/min升到205℃，保持10min，20℃/min升到240℃，保持5min。
七、结果计算
1.单个脂肪酸甲醇含量
2.归一化法
八、注意事项
1. 十一碳酸甘油三酯内标溶液，冰箱4℃避光冷藏保存，有效期1个月
2. 单个脂肪酸甲酯标准溶液，贮存于-20℃冰箱，有效期1个月
3. 混合脂肪酸甲酯标准溶液，贮存于-20℃冰箱，有效期3个月
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