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解决方案

高温miniDAWN测茂金属的支化度

应用领域

检测样品

检测项目

在塑料制造中使用茂金属催化剂是一个革命性的进步。目前,每年销售这种塑料几亿磅,目前其中许多是由其它聚合物催化生产的,不久将转变为由茂金属催化生产。这一新技术将影响用于稳定、改性和聚合物加工的添加剂。据估计在十年内,超过50%的聚乙烯将通过使用茂金属催化剂制造。这对于树脂生产、添加剂供应、复合物、模具和最终用户,将产生一个新的动态环境。

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wyatt 多角激光光散射检测器miniDAWN

mini DAWN

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Eclipse-MALLS是表征病毒粒子

应用领域

检测样品

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The Eclipse,是一个以场流分离(FFF)为基础的粒子分离系统,它可以避免SEC分离病毒粒子的局限。所以Eclipse和MALLS结合又组成了一套很好的分离检测系统。 这篇应用文章用十八度激光光散射仪DAWN EOS和Eclipse组合来分离并表征病毒粒子。

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wyatt 18角度激光光散射仪

DAWN

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TheUltimate Guide toBuying a Light Scattering Instrument

应用领域

检测样品

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您打算购买光散射仪器吗? 越来越多的科学家认识到:用多角度光散射仪测定聚合物和生物高聚物(以及粒子)的性能是唯一一种无需作任何假设就可确定聚合物绝对分子量、分子尺寸和构象的方法。 30多年前,Wyatt技术公司(WTC)的科学家发明了最早商业化的用激光作光源的光散射仪器。从那以后,我公司一直致力于最新型的激光光散射硬件、软件、服务和支持系统的开发和完善。 这本手册简要介绍了光散射原理,可以作为指导,帮助您再购买仪器时作出正确的选择。 这本手册中我们阐述了光散射的基本原理。对某些人来说,这些概念也许很新颖;另一方面,对那些已经熟悉光散射技术的人来说,也将会从中找到丰富的实用信息,帮助他在购买仪器时做出正确的选择。如果您是刚接触这一领域,我们希望这本手册能阐明问题,使多角度光散射仪成为您实验室分析的一个常规仪器。

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关于PEG修饰蛋白的研究

应用领域

检测样品

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生物技术的发展延伸到了用什么样的方法向人体输送药物。怎样才能组织蛋白药物未发挥作用之前就被排出体外。 有许多方法可以对蛋白质进行改性,使其在血液中的药性更有效。其中糖基化和PEG化可能是最广泛的。以前,采用在蛋白分子上接糖基的方法;后来,把聚乙二醇分子以“晶须”的形式接在蛋白分子上,以增加蛋白质的半衰期,使之不容易被水化而排出体外。 这篇文章,测量了一种单克隆抗体在PEG修饰前后的分子量变化,如图1所示,可以看出,抗体在PEG修饰前有一恒定分子量150K道尔顿。 图2显示了同样的抗体共轭了5K道尔顿的PEG分子后的情况。抗体蛋白分子量的变化与所连接的PEG聚乙二醇数量有关。 采用的仪器装置有:miniDAWN多角激光检测器、Optilab DSP示差干涉检测器、HP1050高效液相色谱系统和Pharmacia Superose 1230/10HR柱子。 结果很明显而精确,在这以前从来没有这么容易地测量到蛋白上所连PEG的数目,而现在用miniDAWN,变成了一个很直接方便的实验程序。

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PEGYlated 蛋白改性

应用领域

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糖基化和PEGYlated是蛋白质变型最流行的形式。前者是接上糖,后者接上聚乙二醇绞合线作“须晶”,以增加蛋白质的半衰期并使其不大可能从血液中水解或被排除。本应用简报证实对于PEGYlated蛋白质由一次15分钟色谱实验可以得到巨大数量的信息。图示完全说明miniDAWN与HPLC系统连接的结合能力。由SEC/MALLS分析得出最重要的结论是: 1. 蛋白质-聚乙二醇-蛋白质连接 因为已知蛋白质仅含8个可能的部位与PEG连接,蛋白质与聚乙二醇结合的最大摩尔质量为56K;蛋白质加聚乙二醇(8 x 5K)为16K。但是,ASTRA软件测定该复合物摩尔质量高达100K,这表明存在蛋白质-聚乙二醇-蛋白质复合物。这些出乎预料的复合物可能对该样品的药理性质发生引入注目的影响。 2. PEGYlated的程度 因为miniDAWN的摩尔质量是绝对值,不须做PEG-蛋白质产品构象的假设即可测定PEGYlation程度。 3. 聚集物检测 低浓度但非常粘稠的(Rg<10nm)非常高摩尔质量(--500K)的物质在大约8ml洗脱。显然,这些聚集物与任何其它范围样品相比散射更多的光。由于FDA涉及周围聚集物,在患者中可能产生缓慢响应,在临床试验之前这些聚集物已被清除。用miniDAWN监测蛋白质聚集的减少对蛋白质改型工艺是有帮助的。 4.反应程度 根据未反应PEG的浓度,可以测定PEGYlation反应的程度。这一信息可用于改进反应过程,改善产品配方效果。

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用Optilab测量dn/dc值

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dn/dc值也称为“比折光指数增量”,描述聚合物溶液折光指数相对于溶质浓度的变化。摩尔质量的绝对表征必需测量dn/dc值,因为它是在摩尔质量计算中使用的术语。具有较大dn/dc值的聚合物与质量相同但具有较小dn/dc值的聚合物相比,散射更多的光。因此,知道dn/dc就能根据光散射数据推导摩尔质量。因为dn/dc随波长变化,必须在与光散射仪相同的波长下测量dn/dc值。而且,脱机测量dn/dc值也是有利的,因为联机测量需对已流出总质量作出许多假设。 Optilab DSP能完成脱机测量dn/dc的任务,使这一测量越来越容易。你只需将样品做一系列稀释。然后,将这些稀溶液注入Optilab中,通过DNDC软件自动收集数据。然后,该软件根据Optilab(dn)信号强度和稀溶液浓度(dc)计算dn/dc值。图1表示用带手动进样阀的注射泵通过Optilab DSP进行测定得到的典型dn/dc原始数据。“曲线的平稳段”代表依此注入Optilab P2L池的各个溶质浓度。在次情况下,研究了Nacl样品。制备并注入9种不同浓度。在各样品之间注入纯溶剂,导致重回基线。Wyatt Technology’s Windows-based DNDCTM软件收集来自各浓度平台的数据加以处理,绘出dn/dc值及其统计误差(图2)。该结果迅速、准确、高度重现,dn/dc值也可使用WTC光散射仪器和软件测定绝对摩尔质量而无需作任何假设。Optilab为 dn/dc日常而精确测定提供理想平台。而且,当不使用脱机测量时,也可用灵敏度不匹配的RI检测器在线测量。

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wyatt Optilab 示差折光检测器(DNDC仪)

Optilab

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MALLS-QELS(准弹性光散射)

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十年前Wyatt Technology已为准弹性光散射(QELS)检测器提供接口。现在WTC提供一个完全的在线解决办法,包括多角光散射(MALS)和QELS仪器。QELS仪器可用于测定各种连续流动样品的流体动力学半径(rn)。MALS-QELS系统联用可同时测量rg, rn和绝对摩尔质量。 因为rg(均方根半径)是直接由与角度相关的散射光强度测定的,要进行可靠测量,至少需要三个角度。另一方面,rn是由分子漫射(aka布朗运动)引起的光散射强度的波动推导出的。 QELS测量是在DAWN流通池中联机进行。现代化的光学设计、高灵敏度、极小的死体积和使用方便是DAWN检测器的优良性能。这些特性使其产生比市场上其它仪器都大的信躁比。 光学纤维接受器安装在任何角度定位的MALS检测器读出头上。光学纤维又与经专门改进接受DAWN仪信号的自相关器上的离子雪崩光电二极管连接。本应用简报举例说明了使用体积排阻色谱(SEC)分离牛血清清蛋白(BSA)和糖蛋白得到的结果.RI检测器与MALS-QELS检测器在线连接测定了这两种蛋白质流体力学半径对洗脱时间关系.图1表示出对900激光系统信号重叠的结果。对于这些特定样品rg低于10nm的角度变化检测限。但是MALS-QELS结合允许同时测定绝对摩尔质量、均方根半径(rg约10~500nm)和流体力学半径(rn约1-500nm)。目前可以得到的结果,其分子量范围从低于103到108道尔顿。

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