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细胞中凋亡形态、凋亡细胞计数、定性定量分析检测产品配置单(化学试剂)

  • 应用领域: 医疗/卫生
  • 检测样品: 脱落细胞
  • 检测项目:凋亡形态、凋亡细胞计数、定性定量分析
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  • 发布时间:2019-04-28
  • 参考标准:流式细胞仪检测细胞凋亡实验,
实验原理: 主要根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变,包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等进行检测。
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流式细胞仪检测细胞凋亡可应用于:(1)鉴定细胞凋亡形态;(2)准确的进行凋亡细胞的计数;(3)进行特异的定性分析和定量分析。

 

实验原理:

主要根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变,包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等进行检测。

 

实验材料: 细胞

 

试剂、试剂盒:PBS  PI  蒸馏水  乙醇

 

仪器、耗材:棕色瓶  400目筛网  流式细胞仪

 

实验步骤:

 

一、收集细胞

 

收集细胞{数目约(1~ 5x106/mL},500~ 1 000 r/min离心5 min,弃去培养液。

 

二、细胞洗涤

 

3 ml PBS洗涤1次。

 

三、乙醇固定

 

离心去PBS,加入冰预冷的70%的乙醇固定,4℃1-2小时。

 

四、细胞重悬

 

离心弃去固定液,3 mlPBS重悬5 min

 

五、细胞过滤

 

400目的筛网过滤1次,500-1000 r/min离心5 min,弃去PBS

 

六、染色

 

1 ml PI染液染色,4℃避光30 min

 

七、流式细胞仪检测

 

PI用氩离子激发荧光,激光光波波长为488 nm,发射光波波长大于630 nm,产生红色荧光分析PI荧光强度的直方图也可分析前散射光对侧散射光的散点图。

 

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