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siRNA 样品中溶解温度检测产品配置单(紫外分光光度)

  • 应用领域: 生物产业
  • 检测样品: siRNA 样品
  • 检测项目:溶解温度
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  • 发布时间:2018-12-17
  • 参考标准:暂无
升高温度可诱导双链核酸分离为单链。在一定温度下,碱基对之间的氢键发生断裂。热熔实验利用了腺嘌呤-胸腺嘧啶 (A=T) 与鸟嘌呤-胞嘧啶 (GΞC) 核苷酸之间氢键数的差异。由于 GΞC 核苷酸含有三个氢键,解离所需热能大于 A=T 对所需的热能。这表示含有更多 GΞC 对的 DNA 要在更高的温度下才能熔解。熔解温度 (Tm) 可指示样品中的碱基组成(GΞC 与 A=T 的比例)。制造商和研究人员常将 Tm 用作 QC 校验指标。 使用紫外-可见分光光度法测定熔点,利用的是单链核酸在 260 nm 处的吸光度高于双链核酸的原理。图 1 显示了使用小干扰 RNA (siRNA) 样品的示例,与 25 °C 相比,85 °C 下 260 nm 处的吸光度明显更高。
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升高温度可诱导双链核酸分离为单链。在一定温度下,碱基对之间的氢键发生断裂。热熔实验利用了腺嘌呤-胸腺嘧啶 (A=T) 与鸟嘌呤-胞嘧啶 (GΞC) 核苷酸之间氢键数的差异。由于 GΞC 核苷酸含有三个氢键,解离所需热能大于 A=T 对所需的热能。这表示含有更多 GΞC 对的 DNA 要在更高的温度下才能熔解。熔解温度 (Tm) 可指示样品中的碱基组成(GΞC 与 A=T 的比例)。制造商和研究人员常将 Tm 用作 QC 校验指标。

使用紫外-可见分光光度法测定熔点,利用的是单链核酸在 260 nm 处的吸光度高于双链核酸的原理。图 1 显示了使用小干扰 RNA (siRNA) 样品的示例,与 25 °C 相比,85 °C 下 260 nm 处的吸光度明显更高。

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