近期,美国制药新贵kite-pharma 公司(采用car-t技术进行肿瘤免疫治疗),一次性购买了27台nc-200 用于血细胞样品的计数和活力分析!nc-200已成为细胞治疗领域的必备仪器!它的优越性到底在哪里?
嵌合抗原受体t细胞技术(car-t)以及t细胞受体(tcr)嵌合型t细胞(tcr-t)作为当前过继性细胞回输治疗act技术两大最新的免疫细胞技术,因其能够表达特异性受体,靶向识别特异性的细胞如肿瘤细胞等,受到了学者、医生、患者及投资人的广泛关注。
pbmcs细胞作为免疫系统的重要组成部分,对其进行评估和计数是一切实验开始的基础。标准的分离评估pbmc的方法是通过ficoll分离提取pbmc,再进行样品的计数和活力分析。然而现在,应用nucleocounters® nc-200™,可以无需花费时间纯化血液样品,直接对样品的pbmcs进行细胞计数和活力分析,第一时间掌握样品的基本数据。
血液中除了白细胞,还包含红细胞和血小板(如下图a),因此需要在原始的血液样品中加入血液裂解缓冲液solution17,红细胞被裂解,血红蛋白被稀释,只留下有细胞核的白细胞被染核dna的荧光染料丫啶橙(绿色,染总细胞)和dapi(蓝色,染死细胞)染色(图b)。血小板没有细胞核,所以不会被计数。配套的nucleoview™软件可以显示被计数确认的细胞(c)。
图示.血液样品直接进行白细胞的计数和活力分析
传统的台盼蓝染色原理的机器需要通过设置细胞直径范围来将红细胞和血小板排除出去,但是细胞直径的设置容易引起计数的不准确性。而nucleocounters® nc-200™细胞计数仪之所以能快速、精确、简易的对血液样品中的白细胞进行细胞计数核活力分析,是因为采用染细胞核dna的荧光染料进行染色分析,所以无需根据细胞类型、细胞大小进行细胞直径、细胞团面积等参数的设置,细胞计数结果不会受到任何人为设置参数的影响,重复性高。
目前,nucleocounters® nc-200™的全球用户已包括但不限于:
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