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Molecular Devices CatchPoint cAMP荧光检测试剂盒应用方案解析
G蛋白偶联受体(GPCRs)是重要的跨膜蛋白,能将胞外信号传导入胞内,引起信号逐级放大的级联反应,导致胞内某些蛋白活性或表达的改变[1]。3’, 5’-单磷酸化环腺苷(cAMP)作为第二信使参与GPCR活化后的下游反应。当胞外配体作用于GPCR时,GPCR构象发生改变,激活胞内连接的G蛋白。接下来的信号传导路径与被激的G蛋白类型有关。其中当Gs蛋白被激活时,会导致腺苷酸环化酶活化引起的胞内cAMP浓度上调,进一步激活蛋白激酶A,最终促进一些目标蛋白的磷酸化,这些目标蛋白可能参与了例如多巴胺神经信号传导、葡萄糖再生反应、血管扩张、细胞有丝分裂、卵子成熟等重要生理生化过程[2-6]。
生物产业
2016/07/13
药物研发早期使用高通量筛选系统检测获得相关心肌毒性数据-Molecular Devices FLIPR
使用EarlyTox? 心急毒性试剂盒在FLIPRTetra 系统中已经对心肌细胞的钙离子峰值频率和非典型波形图的浓度依赖性调控方式进行了验证, 并通过ScreenWorks? Peak Pro 软件作进一步的分析。确证参数的改变,如钙离子峰值频率、振幅、峰宽、增长和衰减的时间有助于对构效关系(SAR)方向修正或者排除化合物进入药物化学或临床前研发的评判。另外,这种方法还可以用于作用于心脏的新化合物开发。
生物产业
2015/02/03
贴壁CHO Mito-Photina/H3发光蛋白细胞在高通量筛选系统中的化学发光实验-Molecular Devices FLIPR
对于药物研发早期先导化合物寻找和确认,配有发光蛋白检测应用的FLIPRTETR是简便且可信赖的高通量筛选系统。发光蛋白检测部件包含了增强型CCD (ICCD) 相机和悬浮细胞系统。ICCD相机的增益可调节功能使得高通量FLIPRTETRA系统既可以适应基于染料的明亮的荧光实验,也可以记录信号强度较弱的化学发光蛋白实验。本篇应用文章描述了贴壁CHO Mito-Photina./H3发光蛋白细胞在高通量FLIPRTETRA系统中的实验结果和表现。
生物产业
2015/02/03
使用高通量筛选系统检测Gi和Gs欧联GPCR介导的第二信使cAMP信号变化-Molecular Devices FLIPR
在FLIPR?Tetra高通量筛选系统进行cAMP水平的检测以保证在动力学模式下精确检测Gi和Gs偶联的GPCR活性。通过这样的实验,基于对细胞内相关第二信使cAMP浓度变化的检测可以对GPCR亚型进行评价。
生物产业
2015/02/03
使用高通量筛选系统检测细胞内pH值变化的实验方案-Molecular Devices FLIPR
FLIPRTETRA系统可用于完成多数细胞基础的实验研究。本篇应用研究推荐了细胞内PH值检测实验在FLIPR上运行的基础方案。实验在贴别细胞上完成,同时还讨论了一些重要参数的优化。因为每种细胞系都有其独有的特性,每个研究人员在进行自己的实验时都需要进行单独的优化。
生物产业
2015/02/03
使用电压敏感探针检测细胞膜电位变化-Molecular Devices FLIPR
FLIPRTETRA? 系统配置了390–420nm波长激发光LED以及440–480nm和565–625nm波长的滤光片,使用电压敏感探针(Voltage Sensor Probe,VSP)染料用于基于FRET原理的高通量筛选(HTS)实验,提供了一种新型的细胞基础的膜电位变化检测方法。
生物产业
2015/02/02
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