蜂蜜中麦芽糖检测方案(液相色谱柱)

电话：02131233605 QQ：3259981160 上海宸乔生物科技有限公司 蜂蜜的糖唐测定 本品为蜜蜂科昆虫中华蜜蜂cerana F a b ric iu s 或意大利蜂 melliferaLin naeus所酿的蜜。春至秋季采收， 滤过。 【性状】 本品为半透明、 带光泽、浓稠的液体， 白色至淡黄色或橘黄色至黄褐色，放久或遇冷渐有白色颗粒状结晶析出。气芳香，，味极甜。相对密度本品如有结晶析出，可置于不超过60°C的水浴中，待结晶全部融化后，，搅匀，冷至25°C，照相对密度测定法(通则0601)项下的韦氏比重秤法测定， 相对密度应在1.349以上。 【检查】 水分不得过24.0%(通则0622折光率测定法进行测定) 。取本品(有结晶析出的样品置于不超过60°C 的恒温水浴中温热使融化)1~2滴，滴于棱镜上(预先连接阿贝折光计与恒温水浴，19并将水浴温度调至4o°c±o.rc 至恒温，用新沸过的冷水校正折光计的折光指数为1，3305)测定， 读取折光指数， 按下式计算： X=100-[78+390.7(n-1.4768)] X一样品中的水分含量(% 样品在40°C时的折光指数酸度取本品110g，加加新沸过的冷水 50ml， 混匀， 力加酚 酞指示液2滴与氢氧化钠滴定液(0.J.lm0l/L)4ml，应显粉红色，10秒钟内不消失。淀粉和糊精取本品2g，加水10ml，，力加热煮沸， 放冷， 加碘试液1滴，不得显蓝色、 绿色或红褐色。寡糖取本品2g，，置烧杯中，加入10ml水溶解后，缓缓加至活性炭固相萃取柱(在固相萃取空柱管底部塞人一个筛板，压紧， 置固相萃取装置上。称取硅藻土 0.2g，加水适量混匀，用吸管加至固相萃取柱管中， 自然沉降形成3mm 厚的硅藻土层， 打开真空泵吸引，17称取活性炭0.5g加10ml水搅拌，混匀， 用吸管加人，在真空泵的吸引下使活性炭沉降，当水面接近活性炭层面时，，再次注入0.2g用水混匀的硅藻土， 在真空泵的吸引下， 以1秒/滴的速度用 25ml 的水预洗， 当液面到达柱面上2mm时关掉活塞， 再压入上筛板， 备用)口中，打开活塞，在真空泵的吸引下， 使溶液通过柱子， 待液面下降到柱面以上2mm时，用7%乙醇25ml 洗脱， 弃去洗脱液。再用50%乙醇10ml洗脱， 收集洗脱液，j置65°C水浴中减压浓缩至干，残渣加30%乙醇ltnl 使溶解， 作为供试品溶液。另取麦芽五糖对照品，加30%乙醇制成每lml 含 lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(通贝0512)试验， 吸取供试品溶液与对照品溶液各3M1， 分别点于同一高效硅胶G薄层板上， 以正丙醇-水-三乙胺(60：30：0.7)为展开剂， 展开， 取出， 晾干，，喷以苯胺-二二苯胺-憐酸的混合溶液(取二苯胺lg，，苯胺1ml，磷酸5ml，加丙醇至50ml，混匀) 加热至斑点显色清晰，在日光下检视。供试品色谱中， 在与对 照品相应位置的下方， 应不得显斑点。 5-羟甲基糠醛照高效液相色谱法；(通则0512)测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂·’以乙腈-0.1%日甲酸溶液(5：95)为流动相； 5-羟甲基糠醛检测波长为284nm， 鸟苷检测波长为254nm。理论板数按鸟苷峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备取鸟苷对照品适量，，精密称定， 加10%甲醇制成每lml 含鸟苷 0.2mg 的溶液，即得。另取5-羟甲基糠醛对照品适量，加10%甲醇制成每lml含4鸿的溶液， 作为定位用。供品品溶液的制备取本品lg，置烧杯中，米精密称定，加10%甲醇适量溶解， 并分次转移至50ml量瓶中，精密加入鸟苷对照品溶液1ml，加10%甲醇至刻度，摇匀，即得。测定法精密吸取 供试品溶液10pl，注人液相色谱仪， 测定；另取鸟苷对照品溶液，5-羟甲基糠醛对照品溶液各1(^1，注入液相色谱仪， 测定，用以确定供试品色谱中5-羟甲基糠醛及鸟苷的色谱峰； 以鸟苷对照品计算含量并乘以校正因子0.340进行校正， 即得。 本品含5-羟甲基糠醛， 不得过0.004%. 蔗糖和麦芽糖照(含量测定) 项下方法测定， 分别计算含量。本品含蔗糖和麦芽糖分别不得过5.0%。【含量测定】 照高效液相色谱法(通则0512)测定。色谱条件与系统适用性试验 以 Prevail1Carbohyrate ES 为色谱柱，以乙腈-水(755：：225)为流动相；示送折光检测器检测!。理论板数按果糖峰计算应不低于2000示标准曲线的制备分别精密称取果糖对照品1.0g，葡萄糖对照品0.8g，置同一具塞锥形瓶中，精密加入40%乙腈20ml，溶解，摇匀，作为果糖、 葡萄糖对照品储备液。另精密称取蔗糖对照品 0.2g， 麦芽糖对照品 0.2g，直置同一具塞锥形瓶中，精密加人40%乙腈10ml， 溶解， 摇勻， 作为蔗糖、麦芽糖对照品储备液。分别精密量取果糖、 葡萄糖对照品储备液和蔗糖、麦芽糖对照品储备液， 加40%乙腈配成不同浓度的果糖、 葡萄糖、 蔗糖、 麦芽糖混合对照品溶液。每一浓度溶液配制中， 储备液的用量和稀释体积见下表。精密吸取混合对照品溶液各15^x1，注入液相色谱仪，分别测定。以对照品浓度为横坐标， 以峰面积值为纵坐标，，绘制标准曲线，计算回归方程。供品品溶液的制备取本品约lg，，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加人40%乙腈 20ml，，溶解， 控摇匀， 滤过，.耳取续滤液，即得。测定法精密量取供取品溶液15jul，注入液相色谱仪， 测定，按标准曲线法计算含量。本品含果糖 (C6H1206)和葡萄糖(C6H1206)的总量不得少于60.0%， 果糖与葡萄糖含量比值不得小于1.0。 【性味与归经】 甘，平。归肺、 脾、大肠经。 【功能与主治】 补中， 润燥， 止痛， 解毒； 外用生肌敛疮。 用于脘腹虚痛， 肺燥干咳， 肠燥便秘， 解乌头类药毒；外治疮疡 不敛， 水火烫伤。 【用法与用量】 1 30g。 【贮藏】 置阴凉处。 序号 果糖、葡萄糖 蔗糖、麦芽糖 稀释体积 混合对照品溶液浓度(mg/ml) 对照品储备液体积(ml) 对照品储备液体积(ml) (ml) 果糖 葡萄糖 蔗糖 麦芽糖 1 1.0 0.125 5 10 8 0.5 0.5 2 3.0 0.5 10 15 12 1.0 1.0 3 2.0 0.5 5 20 16 2.0 2.0 4 5.0 2.0 10 25 20 4.0 4.0 5 3.0 1.5 5 30 24 6.0 6.0 第页共页