蛋白质复合物中聚集、流体力学半径检测方案(激光粒度仪)

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检测样品: 其他
检测项目: 聚集、流体力学半径
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发布时间: 2017-07-16
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美国怀雅特技术公司北京代表处

金牌21年

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动态激光光散射仪(Dynamic light scattering,DLS)测量蛋白及其及其聚集状态,纳米颗粒,囊泡等流体力学半径。使用标准比色杯测试。

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PH对蛋白质复合物稳定性和均匀性的影响 来自激烈热球菌的异二聚体蛋白复合物(HPC)在结合RNA中的功能作用被进行了研究。 HPC的总分子量为65kDa,并且通过电子显微镜观察到HPC在体外有形成原纤维材料的倾向。通过使用WyattDynaPro®动态光散射(DLS)系统,我们在各种溶剂条件下表征了HPC的均匀性和稳定性。 我们发现溶液的pH影响样品的均匀性和稳定性。 使用具有Dynamics V7的Wyatt Dyna-ProDLS系统在20℃下获得DLS数据,并且使用Dynamics V7.0.0.95进行了分析。 强度自相关函数(图1)提供了样本尺寸分布的直接指标。 多分散指数提供了样品中的各种分子类别的多分散性的直接计量。多分散指数低于20%意味着分子种类是单分散的,否则是多分散的。结果表明, HPC在pH7.5的(Tris-Cl buffer, 3% NaCl)中,具有19.5%的加权平均多分散性(%Pd),相对于HPC在pH3.0(Tris-Cl buffer, 3% NaCl)中的加权平均多分散性(为27.2%)要低。 对于每个样品进行总共10次测量,由HPC在pH 3.0时的自相关函数具有更长的衰变速率可得,HPC在pH 3.0时比在pH 7.5时具有更多的种类。 正则化后的自相关函数的的直方图(图2)显示了HPC在上述条件下的尺寸分布。从自相关函数观察,尺寸分布直方图显示HPC在pH 7.5时,在4.0nm的较低流体动力学半径附近贡献了一个强峰,平均峰值强度(平均%I)为90.5%; HPC在pH 3.0时,在较高的流体动力学半径处分别产生两个峰,13.0nm(平均%I = 32.85)和112.4nm(平均%I = 64.0%)。结果表明,HPC在pH 7.5比在pH 3.0时确实更均匀和稳定 ,尽管HPC在pH 7.5下的峰可能分裂成两个峰,这两个峰转移到较高的流体动力学半径处。 使用DLS从多分散性和自相关函数得到的的稳定性和均匀性提供了关于HPC的生物物理性质的信息。 本研究的结果有助于验证HPC聚合反应在热力学上更有利的条件,因此,使用适当的生物物理学研究条件(如结构分析)提高样品制备的质量。 Protein Solutions 图1 HPC在pH 3.0和pH 7.5下的自相关函数。1)pH 3.0和pH 7.5(重叠)的缓冲液,2)pH7.5的HPC和3)pH值为3.0的HPC。 3)pH值为3.0的HPC 图2 HPC在pH3.0和pH7.5下的正则化直方图,pH7.5(蓝色)和pH3.0(红色)。 动态激光光散射仪(Dynamic light scattering,DLS)测量蛋白及其及其聚集状态,纳米颗粒,囊泡等流体力学半径。使用标准比色杯测试。
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美国怀雅特技术公司北京代表处为您提供《蛋白质复合物中聚集、流体力学半径检测方案(激光粒度仪)》,该方案主要用于其他中聚集、流体力学半径检测,参考标准--,《蛋白质复合物中聚集、流体力学半径检测方案(激光粒度仪)》用到的仪器有wyatt 高通量 自动化 纳米粒度仪